Criptosporidiosis experimental en ratones albinos tratados con Metilprednisolona / Experimental Cryptosporidiosis in Albino Mice Treated with Methylprednisolone

Cryptosporidium spp., es un coccidio intracelular de distribución mundial responsable de un síndrome entérico en el hospedador inmunocompetente e inmunocomprometido. Se estudio la influencia inmunosupresora de la metilprednisolona (MP) en la evolución de la criptoporidiosis experimental en ratones de laboratorio. Se utilizaron dos grupos de cuatro ratones machos jóvenes cada uno; el primer grupo incluyó cuatro ratones infectados y tratados en forma interdiaria con MP a dosis de 16 mg/kg de peso durante cuatro semanas y el segundo grupo (control) cuatro ratones infectados y no tratados. El inóculo fue preparado a partir de Cryptosporidium spp. obtenido de un paciente con criptosporidiosis intestinal, administrando un volumen de 0,1 mL a través de una sonda oro-esofágica. Cada semana, se recogieron muestras de heces para realizar diagnóstico de criptosporidiosis intestinal mediante la coloración de Kinyoun. Se estudió la diseminación visceral del parásito tomando semanalmente un animal de cada grupo para necropsia, obteniéndose muestras de cada órgano para estudio histopatológico. Las formas parasitarias observadas, en tejidos, fueron como sigue: ooquistes, esporozoítos falciformes, formas sexuales, merozoítos libres y trofozoítos. Durante las cuatro semanas de estudio, la forma parasitaria predominante fue la de merozoíto libre. Se observó diseminación tisular en tráquea, glándula tiroides, intestino, bazo y ganglio linfático. No se observó el parásito en esófago, hígado, riñón y pulmón. En el grupo control la presencia del parásito se mantuvo limitada al intestino. La supervivencia de los animales fue del 100% en ambos grupos durante el período de estudio. La respuesta observada en los animales tratados con MP se expresó de manera evidente en la diseminación tisular del parásito en órganos distintos del aparato digestivo, efecto no demostrado en los animales infectados y no tratados. Sin embargo, el número total de formas parasitarias cuantificadas, no presentó diferencias notables durante las cuatro semanas que duró el experimento, pero si pudo demostrar que no es necesario un alto grado de inmunosupresión para que Criptosporidium spp. produzca formas extra-intestinales de la criptosporidiosis.

Cryptosporidium spp. is an intracellular coccidium distributed worlwide, which is responsible for an enteric syndrome in the immunoincompetent and immunocompromised host. This investigation was conducted to study the immunosuppressing influence of methylprednisolone (MP) during the course of experimental cryptosporidiosis in albino mice. A total of eight young male albino mice were studied and alloted into two groups: Group I: four infected mice treated every other day with a oral dose of 16 mg/kg of body weight of MP given through a stomach tube for four weeks; Group II (Control Group): four infected but untreated mice. A volume of 0.1 mL of an inoculum prepared from Cryptosporidium spp., obtained from stools of a patient with enteric cryptosporidiosis was given via a stomach tube. Every week, stool samples were collected for a diagnosis of intestinal cryptosporidiosis using the Kinyoun staining. The visceral dissemination of the parasite was studied by sampling weekly one animal of each group, and obtaining necropsy samples of each organ for histopathological examination. The parasitic forms observed in tissues were as follows: oocysts, falciform sporozoites, sexual forms, free merozoites, and trophozoites. The parasitic forms that prevailed during the experiment were the free merozoites. Parasitic dissemination to trachea, thyroid gland, intestine, spleen, and lymphatic ganglion was seen. In contrast, the parasite was not observed in esophagus, liver, kidneys and lungs. In Group II, the presence of the parasite was confined to the intestines. Mice survival was 100% for both groups during the study period.The results show that the observed response of animals treated with MP was evident with the parasite dissemination in organs other than the digestive tract, effect not shown in animals from Group II. Nonetheless, the total number of parasitic forms did not show overt differences during the duration of the experiment, although it was demonstrated that a high degree of immunosupression is not required to allow for the Cryptosporidium spp. dissemination in the extraintestinal forms of this disease.

Estudio de la histología y la histopatología como modelo integrador en el proceso de enseñanza-aprendizaje / Study of histology and histopathology as a model integrating the teaching-learning process

Las ciencias de la salud están en la búsqueda de nuevas estrategias para el proceso de enseñanza-aprendizaje, incluyendo cambios notables en sus programas. En la Universidad Central de Venezuela (UCV) y en la Facultad de Medicina se están implementando propuestas innovadoras para los estudios de pregrado y posgrado. De esta búsqueda se origina el modelo propuesto que permite integrar varias disciplinas como anatomía, fisiología, histología, fisiopatología y clínica de los síndromes clásicos infecciosos. La modalidad incluye dos fases con tres modelos: i. sistema gastrointestinal; ii. sistema renal y iii. sistema cardiorrespiratorio. La primera fase corresponde al proceso de enseñanza-aprendizaje y actividades docentes de la asignatura microbiología. La segunda fase, consistirá en la aplicación y evaluación del modelo

The teaching-learning process in health sciences is undergoing changes in the search for new strategies. At the "Universidad Central de Venezuela" in its Faculty of Medicine curricular changes are taking place and proposals are being made for improving the undergrade and postgraduate courses. The proposed model is product of this search intending to integrate several disciplines such as anatomy, physiology, histology, physiopathology and the classic infectious syndromes. The model includes two phases and three models, gastrointestinal, renal and cardio-respiratory. The first instance includes its application in the microbiology course and the second moment the evaluation of the results

Diseminación tisular y efectos histopatológicos producidos por Leishmania mexicana amazonensis en roedores infectados experimentalmente / Tissue dissemination and histopathology effects produced by Leishmania mexicana amazonensis in rodents experimentally infected

Al género Leishmania pertenecen diferentes especies responsables de diversas formas clínicas de leishmaniasis. En este trabajo comparamos los efectos histopatológicos producidos en hamsters (Mesocricetus auratus) y ratones (Mus musculus) infectados experimentalmente por vía subcutánea con 20 x 10(5) amastigotes de Leishmania mexicana amazonensis. Nuestros resultados mostraron en hamsters daños histopatológicos en intestino, escroto, testículo, epidídimo, bazo, hígado, riñón, corazón y pulmón y en ratones en testículo, bazo, riñón y corazón. Estos resultados evidencian diferencias en la diseminación tisular, metástasis cutáneas, efectos histopatológicos y mortalidad, siendo más amplios, tempranos y graves en hamsters que en ratones.

Leishmania comprises different species responsible of a variety of clinical forms of leishmaniasis. In this investigation we compared the histopathological effects produced in hamsters (Mesocricetus auratus) and mice (Mus musculus), inoculated by the subcutaneous route with 20 x 10(5) amastigotes of Leishmania mexicana amazonensis. Our results in hamsters show tissue damage in gut, scrotum, testicle, epididimus, spleen, liver, kidney, heart and lung and in mice we found histopathological changes in testicle, spleen, kidney and heart. These results show differences on tissue dissemination, cutaneous metastasis, histopathological effects and mortality, being more extensive, early and severe in hamsters then in mice.

Diseminación tisular de Cryptosporidium SPP en hospedadores murinos experimentalmente inmunosuprimidos / Tissue spread of Cryptosporidium spp in experimentally immunosuppressed murine hosts

Cryptosporidium spp. es un protozoario parásito perteneciente al Phylum Apicomplexa, el cual ha sido estudiado ampliamente a nivel humano y veterinario por ser el causante de la criptosporidiosis. En este trabajo estudiamos la diseminación tisular del parásito utilizando dos grupos de hospedadores murinos: uno constituido por ratones infectados y tratados con ciclofosfamida (CPA) por su efecto inmunosupresor y el segundo por animales infectados, no tratados. El análisis de las muestras del grupo parasitado y tratado presentó una amplia diseminación en el intestino, la tráquea, el pulmón, el bazo, en ganglios linfáticos, glándula tiroides, además del hígado, mientras que el grupo control mostró diseminación solamente en el intestino. Los resultados obtenidos en los roedores inmunosuprimidos sugieren resultados semejantes en cuanto a diseminación en el humano inmunodeficiente y la importancia de enfocarse hacia la prevención de la infección intestinal por este Coccidia en individuos con alteraciones del sistema inmune.

Coccidiosis humana producida por protozoos enteropatogenos relacionados con el sida: cyclospora cayetanensis, isospora belli, cryptosporidium parvum / Human coccidiosis produced by protozoo enteropathogen relation with the aids; cyclospora cayetanensis, isospora belli, cryptosporidium parvum

Las Coccidiosis humanas producidas por los coccidia emergentes: cyclospora cayetanensis, Isospora belli y Cryptosporidium parvum son protozoarios pertenecientes al Orden Coccidia, phylum Apicomplexa, causando síndrome diarreicos, pero con capacidad de visceralización y de inespecificidad de hospedador, pudiendo causar graves daños en pacientes inmunocomprometidos, ya sea inmunodeficientes por ser HIV+ o inmunosuprimidos, pudiendo originar síndromes diarreicos de corta duración en pacientes inmunocompetentes. Clínicamente estudiamos estas parasitosis en diferentes comunidades, tanto en individuos inmunocompetentes como en pacientes con SIDA. Experimentalmente hemos parasitado animales sanos con ooquistes maduros de Cyclospora cayetanesis y Cryptosporidium parvum procedentes de pacientes con síndrome diarreico (ratones, ratas, hamsters, cobayos, patitos, sapos), en los cuales mediante estudios histopatológicos hemos logrado la diseminación visceral (intestino, hígado, vesícula biliar, bazo, riñon, cerebro, corazón, tráquea, bronquios, pulmón, tiroides, glándulas suprarenales), observando diferentes estructuras de estos coccidia, particularmente estadíos sexuales (macrogametos, microgametocitos maduros, ooquistes inmaduros. En aguas de río cercanas a dos comunidades diferentes, desde el punto de vista socie-económico, detectamos la presencia de ooquistes maduros de estos dos cocidia, así como en animales domésticos y semidomésticos enconvivencia con estas comunidades de diferentes grupos etarios, tales como cerdos, burros, perros, sapos y renacuajos. Por lo cual consideramos que nos encontramos ante una zoonosis. En cuanto a Isopora belli, su incidencia es relativamente baja, pero puede ser incrementada en pacientes inmunocomprometidos. Discutimos y consideramos la ubicación taxonómica de las especies de Isopora, ya que a varias especies de Isopora se les ha encontrado sus hospedadores intermediarios, ubicándoselas en la familia Sarcocystidae. Así, desde el punto de vista genético, se considera que I.belli no pertenece a la familia Eimeriidae, debido a que los árboles filogenéticos obtenidos proveen evidencia molecular de que Isospora belli, corresponde a los coccidia formadores de quistes tisulares.

Microspora: etiological agent in chronic diarrhoea

Microspora is an important pathogen in immunocompromised patients associated with disorders of respiratory, renal and intestinal tract. We have investigated microspora in 76 patients: 55 males (22 HIV seropositives) and 21 females (3 HIV positives), with intermitten chronic diarrhoea, often with alternating symptomatic and asymptomatic days; can vary from one to eight loosely formed stool per day without blood and mucus, with anorexia, nausea, cramping, abdominal pain, weight loss, steatorrhea and abnormal D-xylose absorption. We have collected serial faeces samples using standard concentration for bacterial pathogens. We used the modified trichromic technique to detect sporas of microspora in stool, all state development, including apparently mature spores have been found. Microspora was diagnosed in 38 patients (50,0 pert cent), 19 seropositives: 17 males and 2 females. Other enteropathogenics diagnosed were: cryptosporidum parvum, 42,0 pert cent; cyclospora cayetanensis, 40,7 pert cent; entamoeba histolytica, 38,0 pert cent; blastocystis hominis, 22,3 pert cent; giardia lamblia, 14,4 pert cent; escherichia coli, 35,0 pert cent and klebsiella pneumoniae, 7,8 pert cent. The patients were treated with albendazol: 400 mg twice a day during four weeks good parasitological and clinical response. Microspora was the most important protozoan observed. It has pathogenic significance as cause of chronic diarrhoea, both in immonocompromised and immonocompetent patients

Primer caso de keratoconjuntivitis microsporidial en Venezuela / First case of microsporial keratoconjuntivitis in Venezzuela

Presentamos por primera vez en Venezuela una keratoconjuntivítis epitelial punctata producida por un protozoario del phylum microspora, conocidos bajo el nombre de microsporidia, organismos eukariotes, parásitos obligados, que se propagan por medio de esporas, y los cuales se conocen hoy en día como organismos oportunistas, parasitando tanto a individuos inmunocomprometidos como inmunocompetentes. El paciente venezolano de 47 años de edad, presentó una historia clínica de 10 meses positivo al virus de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) y pneumonía causada por pneumocystis carinicon dos meses de evolución. Sufrió de keratopatía epitelial presentando sensación de cuerpo extraño y visión nublosa en el globo ocular. Exámenes citológicos bacteriales, clamidiales, mycobacteriales y micóticos resultaron negativos. Referido a nuestra clínica y laboratorio de investigación parasitológica, diagnosticamos una keratoconjuntivitis microsporidial, debido a la presencia de esporas Gram+, características de los microsporidia, pudiendo observarse tanto esporas maduras como inmaduras parasitando células epiteliales, de forma oval y midiendo 1.7 x1µ

Incidencia de cyclopora cayetanensis y microspora en pacientes de la, población circunvencina del río Anare (Venezuela) y su presencia en el agua del río / Incidence of cyclospora cayetanensys and microspora in patients of the population in the Anare river (Venezuela) and presence in the rever in the water

Se estudia la incidencia de cyclospera cayetanensis y microspora en cocomitancia con cryptosporidium parvum en dos poblaciones de individuos inmunocomponentes, separadas por un río. Al mismo tiempo se detecta la presencia de C. cayetanensis y microspora, tanto en el agua del río, como la fauna en convivencia con la población (cerdos, perros y sapos). Fueron infectados experimentalmente ratones sanos de laboratorio con el agua del río contaminada con estos tres enteropatógenos emergentes. Comprobada la incidencia de estos prozoarios en poblaciones humanas, animales en convivencia y el agua de río, nos hace considerar que estas parasitosis constituyen una zoonosis, y esta infección zoonótica implica que los animales al igual que el agua constituyen fuentes de infección humana y viceversa

Influencia del AM3 y la spiramicina en la criptosporidiosis de un módelo murino / Influence of AM3 and the spiramycin in the crytosporidiosis of a mouse model

El AM3 constituye un inmunopotenciador capaz de inducir la productividad de interferon V, lo cual hemos demostrado en trabajos previos en otras parasitosis. Estudiamos la influencia del AM3 en un modelo murino, utilizando una cepa humana aislada de un niño en un caso clínico, parasitado con Cryptosporidium parvum. Estudiamos la influencia del AM3 solo, así como también combinada con un antibiótico macrólido, la Spiramicina. En experimentos llevados a cabo durante tres meses, se observa que el AM3 lleva los niveles de parasitosis a cero, durante varios intervalos, mientras que los controles siempre se mantienen con niveles muy altos, con respecto al grupo tratado. La Spiramicina, utilizada clínicamente en la criptosporidiosis, también tuvo un efecto parecido al del AM3, pero no hubo potenciación, considerando que el efecto logrado en la limpieza de parásitos fue óptimo con el AM3. Se llevó un record de diferentes fases del ciclo de vida de Cryptosporidium (ooquistes, esporozoitos, merozoitos, trofozoitos) en relación al porcentaje del número total de parásitos, durante el tiempo en que se realizaron los experimentos. El Am3 es una fracción insoluble químicamente definido como un glucopéptido producido por fermentación y adsorbido en una matriz ínorgánica de sulfofosfato cálcico, el cual ha sido registrado con el nombre comercial de "Inmunoferon" por los laboratorios "Andromaco", Madrid (Almoguerra et al., 1982,1 1984²). Su efecto inmunomodulador lo ejerce mediante un mecanismo de acción a nivel de las células responsables de la respuesta inmune, habiéndose demostrado su propiedad de aumentar la capacidad fagocítica de macrófagos esplénicos y peritoneales en infecciones bacteriales y micóticas (Cañavete et al., 1984,6 Martínez et al., 1981,12 Rodríguez et al., 1983,16 Gillisen 1985,8 Rojo et al., 1986).17 En parasitosis ha sido usado en la relación parásito-hospedador de protozoarios patógenos humanos (Leishmania donovani, Trypanosoma cruzi, Toxoplasma gondii), habiéndose demostrado en esplenocitos y timocitos la capacidad de producir citoquinas, como el Interferon gamma, capaz de ejercer un efecto microbicida (Arcay et al., 1992,5 Arcay & Pivel, 1985, Arcay &pivel, 1986).4. Nos proponemos estudiar la influencia del AM3 en un modelo murino con una infección experimental con Cryptosporidium paryum, así como la influencia del AM3 combinado con el uso de un antibiótico macrólido, como es la Spiramicina.

Criptosporidiosis experimental en la escala de vertebrados: I infecciones experimentales, II estudio histopatológico / Experimental cryptosporidiosis in the vertebrates scale: I experimental infections, II histopathological study

A partir de una cepa de cryptosporodium parvum aislada de un caso clínico de un niño, se infectaron experimentalmente especies representativas de la escala de vertebrados (mamíferos, aves, reptiles, batracios y peces). Se logró la infección en todas ellas. Al mismo tiempo las infecciones cruzadas desde los vertebrados a ratones de laboratorio, permitieron la infección heteróloga. Se hizo un estudio histopatológico en cada uno de esos hospedadores, encontrándose todos los estadios del ciclo de vida de cryptosporodium, en heces y visceras (ooquistes maduros, esporozoitos, trofozoitos, esquizontes, gamontes, cigotos, ooquistes inmaduros). Nuestros resultados demuestran y confirman la poca especificidad del parásito con respecto a esos diversos hospedadores

Cryptosporidium en ríos de Venezuela: encuesta epidemiológica de una población humana y fauna en convivencia / Cryptosporidium in Venezuelan rivers: an epidemiological survey of a human population and the coexistent fauna

Se examinaron muestras de agua de ríos de Venezuela en diferentes localidades con el objeto de detectar la presencia de Cryptosporidium sp. De un total de 10 ríos examinados, 6 resultaron positivos (60 por ciento ). Se estudiaron dos poblaciones humanas de un río seleccionado (Río Anare): a) pacientes de un Hospital Psiquiátrico en la margen derecha del rio; b) pacientes de una zona marginal del lado opuesto del río. En esta última población se estudió también la presencia de Cryptosporidium en la fauna doméstica (perros, gatos, burros, cerdos) y en la fauna silvestre (aves, batracios y peces). Resultando un alto índice de infección en las aguas de este río (8,333.33 ooquistes/litro de agua); 57,3 por ciento pacientes positivos del Hospital; 73,8 por ciento pacientes positivos de la zona marginal. Todos los mamíferos domésticos estudiados fueron positivos. En la fauna silvestre se describe por primera vez el pelícano, a Bufo marinus y renacuajos como hospedadores de un parásito humano.

Relación parásito-hospedador en la interacción de protozoarios patógenos humanos con células de exudado peritoneal de ratones mediante la influencia del AM3 / Hosp-parasitc relationship in the interaction protozouns pathosemic to humans and peritoneal exudate cells of mouse under the influence of AM3

Estudiamos el efecto del inmunopotenciador AM3 ("Inmunoferon") en la interación de promastigotes de Leishmania Donovani con células de exudado peritoneal de ratones (cep) mediante dos tipos de experimentos: I) cep de ratones previamente tratados con AM3 y promastigotes de L. Donovani; 2) cep de ratones normales y promastigostes de L. Donovani mediante la acción de sobrenadantes de cultivos de esplenocitos procedentes de bazos de ratones pretatados con AM3. Observamos que el porcentaje de adhesión de los promastigotes a las cep es mayor en los grupos tratados, mientras que el porcentaje de macrófagos parasitados es menor en los tratados que en el control; las formas de división de los parásitos libres es casi nula en los tratados, mientras que el porcentaje de formas intermediarias de los parásitos flagelados se ven favorecidas por la acción del AM3, tales como divisiones celulares anómalas y alteraciones degenerativas en las estructuras que contienen DNA (núcleos y kinetoplastos), así como degeneraciones en el citoplasma del parásito

Genital coccidiosis in the golden hamster (Cricetus cricetus) produced for Eimeria genitali sp. nova

Hemos encontrado en hamsters machos (Cricetus cricetus), una infección natural de un coccidia en sus órganos genitales, el cual es capaz de diseminarse en algunas vísceras. Proponemos el nombre de Eimeira genitali sp. nova para esta especie. Realizamos infecciones experimentales en ambos sexos del hamster, donde describimos cada una de las fases de su ciclo vital (esquizogonia, gamogonia y esporogonia). Describimos también la histopatología de las infecciones naturales en el hamster macho, así como la de las infecciones experimentales de la hembra, inducida per os o por irrigación vaginal, tanto en los órganos genitales como en las otras vísceras en las cuales hemos observado diseminación del parásito

Interacción de promastigotes de Leishmania donovani con celulas de exudado peritonial de ratones mediante la influencia de la quimotripsina / Interaction of Leishmania donovani promastigotes with peritoneal exudate cells of mice under the influence of chymotrypsin

Se hace un estudio de la interacción de promastigotes de Leishmania donovani con células de exudado peritoneal de ratón (c e p) mediante la influencia de la quimotripsina. La adhesión de los promastigotes a las c e p fue terminal y marginal, y en observaciones hechas a partir de los 10 minutos de enfrentamiento, esta adhesión fue nula hasta los 30 minutos en el grupo tratado, y sólo a las das horas hubo un pequeño incremento (2.4%) con respecto al control. Se observa marcada disminución en todos los parámetro medidos, tales como enlace, penetración, multiplicación intracelular, división de formas flageladas, en el grupo tratado. La quimiotripsina favorece la formación de formas intermedias flageladas, heciendose el parásito piriforme y esférico, apareciendo una forma aberrante de extremo anterior cilindrico que semeja a una forma coanoflagelada. Se sospecha que la enzima reduce efectivamente fragmentos proteicos o péptidos, los cuales pueden haber sido tan pequeños como para esconder a otros ligandos relacionados con la adhesión macrófago-parásito